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MALDI-TOF-MS成像法测定鼠脑中谷氨酸受体与配体的亲和常数

谷氨酸受体；亲和常数；质谱成像

谷氨酸受体分为两类:一类为离子型受体，包括:N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)、海人藻酸受体(KAR)和α-氨基-3-羟基-5 甲基-4 异恶唑受体(AMPAR)，负责中枢神经系统中兴奋性突触传递，对大脑正常功能运行至关重要，并且是记忆活动的重要参与者，也参与中枢神经系统的疾病【1】;另一类属于代谢型受体(mGluRs)，它与膜内G-蛋白偶联，这些受体被激活后通过G-蛋白效应酶、脑内第二信使等组成的信号转导系统起作用，产生较缓慢的生理反应【2】。谷氨酸受体在鼠脑内分布广泛，近年以来，用于测定受体配体结合常数比较常见的方法有放射性配体标记法、荧光标记法、毛细管电泳法等，而质谱技术则无需使用多余的标记或者对分子进行结构修饰，即可直接对分子进行精准的检测与结构鉴定，且质谱可以在单次实验中同时获取成千上万种分子的信息。基质辅助激光解吸电离质谱成像（MALDI MSI）已成为一种强大的无标记工具，是一种非常灵敏的分子成像技术，可提供组合的分子信息和空间分辨率【3-4】。它允许从组织切片、单细胞或其他物质表面直接鉴定和定位化合物分子，用于内源或外源分子的可视化，在不同条件下直接从组织切片提供内容和分布信息。但是，传统的基质无法形成均匀的结晶，会对样品信号的稳定性造成一定程度的干扰，影响实验的重现性，本研究采用了一种半导体纳米材料压片作为新的基质，这种材料易制成光滑不易松散的膜片，可以极大程度避免结晶不均匀的情况，保证了成像信号的稳定性，可应用于脑组织成像。