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PC12细胞中多巴胺的提取与检测

肾上腺嗜铬细胞瘤细胞；帕金森病；多巴胺；基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞是一种常见的用于研究神经退行性疾病的细胞模型。帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是一种常见的神经系统变性疾病，帕金森病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺（dopamine，DA）能神经元的变性死亡，由此而引起纹状体多巴胺含量显著性减少而致病。多巴胺作为一种PC12细胞内的小分子物质，在中枢神经中起着非常重要的作用。多巴胺浓度的变化对人体健康产生重大影响，异常多巴胺水平帕金森病息息相关。因此，找到多巴胺测定方法至关重要。已经报道了许多用于测定多巴胺的方法，包括色谱与质谱联用，紫外分光光度法，电化学发光，荧光和电化学技术。尽管这些方法具有相对较低的检测限，但大部分由于来自共存物种的干扰而具有低选择性，且需要耗时的多个修饰步骤。因此，需要探讨新的分析方法，以便于方便，可重复，高灵敏度和高选择性地检测多巴胺以及PC12细胞内的其它小分子物质。 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)很少被考虑用于测定多巴胺以及细胞内的其它小分子物质。作为软电离技术，MALDI-TOF-MS可提供速度，灵敏度，准确性，可重复性和无标记结果。MALDI还提供高吞吐量，同时，与其他方法相比，其较高的盐和缓冲容忍特性可大大简化样品制备。在选择合适的富集方法和MALDI基质之后就可以提供在不同的培养条件下PC12细胞中多巴胺以及其它小分子的变化情况，从而更好地进行帕金森病等神经退行性疾病机理的研究。